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处理和保存

    
  处理和保存昆虫外生殖器备作研究的方法很多,经常使用而比较好的有:

  1).制片保存 昆虫的外生殖器,一般说来角质化都比较强。因此,提取出来的材料,最好要经过脱水、透明手续后用加拿大树胶封在玻片中保存。因作好的生殖器玻片已与原来的标本分开,为防止混乱和丢失,玻片上一定要贴好与原标本完全相同的标签,写明种类、采集地点、日期及标本上的原来编号,然后放在玻片标本盒中保存。制片方法如下:

  (1)加拿大树胶制片法
  将解剖出的昆虫外生殖器放在10%的氢氧化钾(KOH)溶液中,水浴加热数分钟(时间看虫体的骨化程度而定),把不必要的肌肉、脂肪清除掉,用水洗净,经品红染色,放入75%的酒精中保存备用。制片时用各种浓度的酒精(85%,90%,95%),进行脱水处理。每更换一次浓度必须经过相当长的时间(一般约15分钟)。骨化较强的材料,要在每个浓度中延长时间。然后再放人100%的酒精(无水酒精) 中,浸泡约半小时或更长些。每次更换浓度时,要用滤纸或脱脂棉把原来酒精吸收干净。以上这一步骤称为脱水。进行封片的标本所以要进行脱水这一过程,是因为树胶和水不能溶解在一起,如将带有水分的标本封在胶中,便会混浊不清或使标本变质,不易保存。
  经过脱水的标本再放人二甲苯中把酒精替出,并起到透明作用。标本移到二甲苯中时,若溶液发现混浊现象,表示水分尚未脱净,应再退回到100%的酒精中去处理。在二甲苯溶液中的时间不宜过长,只要虫体完全透明,便可移到载玻片上。将虫体位置摆好,并把标本边缘多余的二甲苯吸去。立即滴上加拿大树胶,随即盖上盖片。盖片时必须小心,用镊子或手夹住盖片的一端,斜向着载玻片,使盖片的一端先碰到树胶,然后很快将手或镊子松开,使盖片自然地贴在胶液上。这样可避免产生气泡。如果仍有气泡发生,可用针轻压盖片,或在载片下稍加热。但最好等待几小时或在50度恒温箱中放置一段时间,较小气泡就会自然消失。
  如果树胶量加得合适,盖玻片放好后,树胶刚好溢到盖片的四周。如盖片下面仍有树胶未溢到之处,说明加胶不充足。应及时用拨针粘树胶滴在盖片下缺胶部位的边缘,胶便自然渗入与盖片下的胶液愈合。加胶时千万不要将胶掉在盖片上。盖好盖片后,在载片的一端写上临时标签,放在平稳清洁但要通风的地方,最好放在上面有玻璃盖的、下面有通风纱窗孔的晾片盒中。也可将载片放在用硬纸板作的,每张载片之间有隔格的晾片盘中,平稳地放在干净的书柜中,使其自然干燥。经过10-15日后,盖片周围外溢的胶液已开始干固,便可开始修整,先用小别刀刮去载片上多余的树胶,或用小毛笔蘸少许二甲苯轻轻擦去树胶(但不要触动盖片),并擦净载片上的灰尘,贴上正式标签,一张玻片才算作好了。在未加修整前如果看到盖片下标本的四周有似白色雾状体时,那是因脱水不净造成的。此种玻片标本不能使用,如是稀有标本应及时将整个玻片故在二甲苯中,溶去胶液取出标本,重新脱水、透明制作。封片时所用胶液如果过稀时,干固时由于二甲苯的蒸发会使盖片下产生空隙,称为脱胶。此时可先在盖片下的空隙中滴入少许二甲苯,使原来胶液的边缘溶解后,再用拨针滴人胶液,使其自然流人即可。一旦技术熟练后,上述许多缺点便会自然克服。
  加拿大树胶,是在化学试剂商店买的成品。如是树胶干粉,可先在干净玻皿中磨细,加入适量二甲苯溶解,装人细颈瓶中备用。

  2)甘油鱼胶制片法
  先把鱼胶切成小块,在蒸馏水中浸泡2小时。连同放鱼胶的溶器放在沸水中隔水煮至鱼胶块完全溶解后,加入甘油与石碳酸,同时用玻棒加速搅拌,趁热过滤,保存在有色瓶中。甘油鱼胶的配方是:
   清洁的鱼胶 4克
   蒸馏水 70毫升
   纯甘油 80毫升
   石碳酸 2毫升
  这种胶液冷却后便会凝固,用时先把胶瓶放在热水中溶解。制片时先把标本放在甘油及水各半的混合液中一段时间。并将载片擦干净烤暖,把标本放在适当位置,然后整姿,加甘油鱼胶在标本上,盖上盖玻片,贴好标签便可。
  用这种胶液制片,可省略脱水手续,作为一般观察效果很好。但在高温潮湿地区使用,长期保存,盖片边缘的胶有生霉现象,可用毛笔蘸少许石碳酸清除。 

  2).贴封保存 是用厚纸剪成长方形块,在一端的中央打好圆形孔,先用透明玻璃胶纸贴好一面,将处理好的外生殖器标本沾粘在胶纸向内的一面上,再用另一张胶纸贴好,或先用两块胶纸把材料贴封在中间,再用两块打好圆洞的方形纸将其粘合在中间,然后在纸块上注明种类、采集日期等,插在原来标本的标签下方。贴封保存昆虫外生殖器适合于体型较小的种类。这种方法的优点是外生殖器不离开原来的标本,可随时取下在镜下观察。缺点是保存时间长久,胶纸失去原有的粘韧性而发脆龟裂,将材料损坏。

  也可在打好圆孔的厚纸片上,先贴上一块盖玻片,上面滴上胶液,放上经过脱水透明后的昆虫外生殖器,再用四分之一大小的盖片封盖好。这种方法则兼顾了制片与贴封两种方法的优点。 

  3).瓶装保存 是将用甘油临时封装法观察研究过的昆虫外生殖器材料,用甘油浸泡装在小玻璃管内,同原来标本插在一支昆虫针上,日后随用随取。甘油浸泡又能增加标本的透明度便于观察;缺点是日久甘油会透过瓶塞外溢而挥发掉,要注意检查补充。也可用由聚乙烯制成的小瓶封存。因聚乙烯不受普通酸及溶剂的影响,且不易破碎。瓶塞可用白硅酮橡胶制成。瓶塞稍有坡度以便贴合塞入瓶中。在一角度用针刺穿瓶塞以防甘油流出。这种装昆虫外生殖器小瓶直径为5.5毫米,带塞长17毫米。
                

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